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    自身抗體檢測在自身免疫病中的臨床應用專家建議

    自身抗體檢測在自身免疫病中的臨床應用專家建議

    自身抗體檢測是自身免疫病診治中的重要工具,隨著早期診斷、規范化****的開展,自身抗體檢測在疾病診斷、監測及預后評估中發揮的作用也日益受到重視。但是,由于目前自身抗體檢測缺乏統一的標準化檢驗方法,加上工作條件、傳統診療習慣、結果判讀以及醫療保險限制等因素的影響,導致自身抗體檢測在臨床應用上存在著不統一、不規范現象。因此,制定適合我國國情的臨床應用建議十分必要,可為廣大臨床醫師和檢驗醫師提供參考。

    《自身抗體檢測在自身免疫病中的臨床應用專家建議》(以下簡稱為《建議》)形成分 3 步進行。首先由來自全國大型教學醫院風濕免疫科醫師通過檢索國內外文獻并結合中國實際情況起草《建議》草案,然后將該草案提交由風濕免疫科、檢驗科、消化科、血液科、神經內科等組成的專家組討論,補充和提出修改意見,修改后的草案再次由起草成員討論,形成初步建議,并對每項建議條目進行解讀。

    **后提交由中國免疫學會臨床免疫分會專家進行投票評分(Delphi 評分,分值 0-10 分,0 分表示完全不贊同,10 分表示完全贊同),計算所有專家打分的 x+s 作為每條建議的專家認可度?!督ㄗh》包括 13 條,每一條都附有基于 GRADE 法的證據分級、證據質量和專家認可度及其 95% 可信區間 (95%CI)。

    1 自身免疫病概述

    自身免疫病是由于免疫功能紊亂,機體產生針對自身抗原的病理性免疫應答反應而引起器官或系統損傷的一類疾病。根據臨床表現和病變累及的范圍,自身免疫病可以分為系統性和器官特異性,前者以 SLE、SSc、RA、APS 等為代表;后者包括自身免疫性肝炎 (AIH)、PBC、自身免疫性甲狀腺炎、胰島素依賴性糖尿病等。

    自身免疫病的發病機制尚不完全清楚,目前認為是遺傳易感個體在環境因素如感染、紫外線、腫瘤及藥物等多種因素共同作用下發生。自身免疫病通常伴隨免疫系統功能紊亂、自身反應性 T 細胞、B 細胞的活化和自身抗體、炎性因子的產生。由于自身抗體的產生是自身免疫病的基本特征之一,因而,自身抗體本身就成為大多數自身免疫病的血清學標記物。

    2 自身抗體的分類、臨床意義和檢測方法

    2.1 系統性自身免疫病相關自身抗體

    2.1.1 ANA:ANA 是一組將自身真核細胞的各種成分脫氧核糖核蛋白、DNA、可提取核抗原和 RNA 等作為靶抗原的自身抗體的總稱,是自身免疫病**重要的診斷指標之一。ANA 的檢測方法很多,目前間接免疫熒光法 (IIF) 仍然是 ANA 檢測****方法。ANA 陽性提示體內存在一種或多種自身抗體,應結合其他臨床資料判定其意義。

    2 .1.2 抗 ENA 抗體譜:ANA 的靶抗原眾多,采用鹽析法從細胞核中提取出來,且不含 DNA 的一類抗原統稱為 ENA。臨床常用抗 ENA 抗體主要包括抗 Sm、U1-RNP、SSA、SSB、Jo-1、Scl-70 和核糖體 P 蛋白抗體等???nbsp;U1-RNP 抗體可在多種風濕性疾病出現,但高滴度抗 U1-RNP 抗體對 MCTD 有診斷意義。

    抗 Sm 抗體是 SLE 高度特異性的血清學標記物,在一些檢測方法中常與抗 U1-RNP 抗體相伴出現,目前由于重組抗原的應用,可以出現單獨抗 Sm 抗體陽性???nbsp;SSA 抗體和(或)抗 SSB 抗體陽性是診斷 SS 的血清學標準???nbsp;SSA 抗體的靶抗原由相對分子質量為 60 000 和 52 000 的 2 種蛋白質組成,抗 SSA-52 000 可出現在多種自身免疫病中,一般不作為診斷依據;抗 SSA-60 000 抗體與 SS 密切相關???nbsp;SSB 抗體是 SS 的特異性抗體。

    抗 Sc1-70 抗體是 SSc 分類標準中的血清學標記物,與預后不良、肺纖維化、心臟病變有關??怪z粒蛋白 (CENP) 抗體是局限型 SSc 特異性的血清學標記物,提示預后良好???nbsp;Jo-1 抗體屬于抗氨基酰 tRNA 合成酶抗體群,在 DM 或 PM 患者中的陽性率約為 25%-30%,該自身抗體群還包括抗 PL-7、PL-12、EJ 等。

    抗 Mi-2 抗體幾乎只出現于 DM 患者,陽性率約為 20%???nbsp;PM-1 抗體是 PM 較特異的自身抗體,在 PM 患者中陽性率約為 13%。目前,這些自身抗體的常用檢測方法是 ELISA 和免疫印跡法。

    2.1.3 抗dsDNA 抗體:該自身抗體對診斷 SLE 有較高的特異性 (95%),是 SLE 分類標準之一。其抗體滴度在多數 SLE 患者中與病情活動程度相關,可作為****監測和預后評價的指標,并與 SLE 患者的腎損害相關。目前公認的檢測方法為 IIF、放射免疫法(Farr 法)和 ELISA 法。

    2.1.4 抗核小體抗體 (AnuA):AnuA 可出現于 SLE 的早期,并且敏感性、特異性均較高。在 SLE 患者中陽性率為 50%-90%,特異性 >90%。常用的檢測方法為 ELISA。

    2.1.5 抗 Clq 抗體:抗 Clq 抗體除與低補體血癥蕁麻疹性血管炎、RA 等相關外,與 SLE 患者并發 LN 及其活動性也密切相關。常用的檢測方法是 ELISA。

    2.1.6 抗磷脂抗體譜:抗磷脂抗體譜主要包括狼瘡抗凝物 (LA)、抗心磷脂(CL) 抗體、抗β2 糖蛋白 I(β2GP I)抗體、抗凝血酶原(PT)抗體和抗磷脂酰絲氨酸 (PS) 抗體等,在我國 SLE 患者中檢出率約為 20%-30%,是 SLE 預后不良的重要標志。檢測 LA 或抗 CL-IgG/lgM 或抗β2GP I-IgG/lgM 是診斷 APS 的血清學標準。LA 通過體外凝血時間來定性測定,其他抗體常通過 ELISA 的方法進行定量檢測。

    2.1.7 ANCA:ANCA 的靶抗原有十余種,與臨床**相關的是蛋白酶 3(PR3) 和髓過氧化物酶 (MPO),兩者與 ANCA 相關血管炎,即肉芽腫性多血管炎 (GPA)、嗜酸性肉芽腫性多血管炎 (EGPA)、顯微鏡下多血管炎 (MPA),以及這些疾病的腎臟表現密切相關。IIF 和 ELISA 聯合應用是檢測 ANCA 的****方法。

    2.1.8 抗內皮細胞抗體 (AECA):AECA 與血管炎和多種風濕病中的血管內皮損傷有關,如白塞病、肉芽腫性多血管炎、SLE、SSc、過敏性紫癜腎炎(HSPN) 等??贵w滴度與病情活動性具有相關性。目前檢測 AECA 常用的方法是 ELISA 和 IIF。

    2.1.9 RF:lgM-RF 是 RF 主要類型,在 RA 患者中的陽性率為 70%-90%,是 2010 年 ACR/EULAR 頒布的 RA 分類標準中的血清學檢測項目之一。另外,IgA-RF 和 IgG-RF 對 RA 的診斷也可能有一定提示意義。免疫比濁法、ELISA 和化學發光法是目前常用的 RF 定量檢測方法。除 RA 外,RF 也可見于其他自身免疫病、多種感染以及腫瘤性疾病等。

    2.1.10 抗瓜氨酸化蛋白/肽抗體 (ACPA):ACPA 是一組對 RA 高度特異的自身抗體。AKA/APF 屬于抗絲聚蛋白抗體(AFA) 群,可出現在 RA 早期,同時與 RA 病情活動性指標呈正相關,目前常用檢測方法為 IIF???nbsp;CCP 抗體是 RA ****的分類標準中的血清學檢測項目之一,敏感性、特異性均較好??构习彼峄ㄐ蔚鞍卓贵w對 RA 也有一定的診斷價值。目前,抗 CCP 抗體和抗瓜氨酸化波形蛋白抗體檢測的**常用方法是 ELISA。

    2.2 自身免疫性肝病相關自身抗體

    2.2.1 AIH 和 PBC 相關 ANA 譜:ANA 在 AIH 患者中陽性率可高達 70%-80%,是疾病診斷評分的指標之一,但是缺乏疾病特異性。PBC 患者 ANA 陽性率為 50% 左右,在抗線粒體抗體 (AMA) 陰性 PBC 患者中的陽性率可達 85%???nbsp;Spl00 抗體和抗 PML 抗體在 PBC 患者中的陽性率分別可達 30% 和 20%???nbsp;gp210 抗體和抗 p62 抗體在 PBC 患者中的陽性率分別是 17%-35% 和 20%-30%,是 PBC 高度特異性的標記物(特異性>95%)。

    2.2.2 AIH-1 型和 AIH-2 型相關的自身抗體:抗平滑肌抗體 (ASMA) 和 ANA 與 AIH-1 型相對應。IIF 是檢測 ASMA 獲得****特異性和敏感度的方法??垢文I微粒體 -1(LKM-1)抗體、抗肝細胞溶質 -1(LC-1)抗體用來定義 AIH-2 型,通常用 ELISA 或免疫印跡法來檢測??箍扇苄愿慰乖?nbsp;- 胰腺 (SLAILP) 抗體是 AIH 的特異性抗體,一般不作為 AIH 分型依據,可通過 ELISA 或免疫印跡法來檢測。

    2.2.3 抗線粒體抗體 (AMA):AMA 是 PBC 的標志性抗體,陽性率 90%-95%。根據靶抗原不同分為 9


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